產(chǎn)品名稱:谷氨酸(Glu)含量檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品型號(hào):BC1580
產(chǎn)品特點(diǎn):谷氨酸(Glu)含量檢測(cè)試劑盒Glu廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,不僅是組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸之一,而且通過轉(zhuǎn)氨基作用參與多種氨基酸合成,是生物體內(nèi)主要氨基來源之一。
免費(fèi)咨詢:010-50973130
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣 產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價(jià)格:360
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: : 谷氨酸檢測(cè)試劑盒|Glu檢測(cè)試劑盒|谷氨酸|試劑盒
簡(jiǎn)要介紹:
Glu廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,不僅是組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸之一,而且通過轉(zhuǎn)氨基作用參與多種氨基酸合成,是生物體內(nèi)主要氨基來源之一。此外,Glu還是味精的主要有效成分,常用做食品添加劑以及香料生產(chǎn)。
谷氨酸脫氫酶(GDH)催化谷氨酸和NAD生成α-酮戊二酸、NADH和NH4+,引起340nm處吸光度的上升,通過測(cè)定340nm吸光度的變化,計(jì)算谷氨酸含量。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:液體100mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體5mL×1瓶,4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存,臨用前加入40mL試劑一;
試劑四:粉劑×1瓶,-20℃保存,臨用前加入2.5mL 試劑二;
標(biāo)準(zhǔn)品:液體0.5mL×1支,4℃保存。10μmol/mL 谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)品。
產(chǎn)品說明:
Glu廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,不僅是組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸之一,而且通過轉(zhuǎn)氨基作用參與多種氨基酸合成,是生物體內(nèi)主要氨基來源之一。此外,Glu還是味精的主要有效成分,常用做食品添加劑以及香料生產(chǎn)。
谷氨酸脫氫酶(GDH)催化谷氨酸和NAD生成α-酮戊二酸、NADH和NH4+,引起340nm處吸光度的上升,通過測(cè)定340nm吸光度的變化,計(jì)算谷氨酸含量。
試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰、蒸餾水。
操作步驟:
一、谷氨酸提取
細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品:收集細(xì)胞或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每1000萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),10000rpm,常溫離心10min,取上清待測(cè)。
稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一進(jìn)行冰浴勻漿,10000 rpm,常溫離心10min,取上清待測(cè)。
二、測(cè)定步驟
將標(biāo)準(zhǔn)品分別稀釋為2.5、1.25、0.625、0.313、0.156、0.078、0.039μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
(1)標(biāo)準(zhǔn)管:在1 mL石英比色皿中加入200μL標(biāo)準(zhǔn)溶液、800μL試劑三和50μL試劑四混勻,立即記錄340nm處20s時(shí)的吸光值為A1和5min20s時(shí)的吸光值A(chǔ)2,計(jì)算?A=A2-A1。
(2)測(cè)定管:在1 mL石英比色皿中加入200μL樣本、800μL試劑三和50μL試劑四混勻,立即記錄340nm處20s時(shí)的吸光值為A1和5min20s時(shí)的吸光值A(chǔ)2,計(jì)算?A=A2-A1。
三、谷氨酸含量計(jì)算
以谷氨酸含量(µmol/mL)為x軸,標(biāo)準(zhǔn)管?A為y軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線y=kx+b。將測(cè)定管?A帶入方程得到x值。
2、氨基酸含量計(jì)算:
(1)按照蛋白濃度計(jì)算
谷氨酸含量(µmol/mg prot)=x×V樣本÷(Cpr×V樣本)=x÷Cpr。
(2)按照樣品質(zhì)量計(jì)算
谷氨酸含量(µmol/g鮮重)=x×V樣本÷(W÷V樣總×V樣本)=x÷W。
(3)按照細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算
谷氨酸含量(μmol/104 cell)=x×V樣本÷(1000÷V樣總×V樣本)=0.001x。
V樣總:加入提取液體積,1mL;V樣本:加入的樣本體積,0.2mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣品質(zhì)量,g;1000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),1000萬。
注意事項(xiàng):
為提高檢測(cè)靈敏度,測(cè)定管的吸光值應(yīng)小于1且?A小于0.4,若大于此值則需要將上清液用試劑一稀釋適當(dāng)倍數(shù)后測(cè)定。
谷氨酸(Glu)含量檢測(cè)試劑盒
相關(guān)文獻(xiàn):
《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng,Yanyan Li,Muhammad Ali Abid,Muhammad Askari,Peilin Wang,Yuan Wang,Guoqing Sun,Yongping Cai,Shou-Yi Chen,Yi Lin,Rui Zhang,Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影響因子:3.712 PMID:
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