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Masson三色染色液(固綠法)

產(chǎn)品說(shuō)明：
結(jié)締組織狹義上是指其含有的三種纖維：膠原纖維、網(wǎng)狀纖維、彈力纖維，而膠原纖維(collagenfiber)是分布、含量多的一種纖維。Masson 三色染色又稱(chēng)馬松染色，是結(jié)締組織染色中的一種方法，是膠原纖維染色的技術(shù)方法。所謂三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān)：分子的大小由分子量來(lái)體現(xiàn)，小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織；而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。然而，淡綠或苯胺藍(lán)的分子量都很大，因此 Masson 染色后肌纖維呈紅色，膠原纖維呈綠色(淡綠)或藍(lán)色(苯胺藍(lán))，主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。

三色染色的特點(diǎn)：
①染色穩(wěn)定；
②分化時(shí)間短，1～2s；
③色彩清晰鮮艷；
④適用范圍廣，適宜于組織的石蠟切片、冰凍切片等染色；
⑤所染切片保存時(shí)間長(zhǎng)且不易褪色。
自備材料：
1. 固定液：選用甲醛升gong或甲醛鹽溶液
2. 系列乙醇
3. 蒸餾水
操作步驟：
1. 切片常規(guī)脫蠟水，用配制好的 Weigert 鐵蘇木素染色 5～10min。
2. 用酸性乙醇分化液分化，水洗。
3. 用 Masson 藍(lán)化液返藍(lán)，水洗。
4. 蒸餾水洗 1min。
5. 麗春紅品紅染色液染色 5～10min。
6. 在上述操作過(guò)程中按蒸餾水:弱酸溶液=2:1 比例配制弱酸工作液，用弱酸工作液洗 1min。
7. 磷鉬酸溶液洗 1～2min。
8. 用配制好的弱酸工作液洗 1min。
9. 直接入固綠染色液中染色 1～2min。
10. 用配制好的弱酸工作液洗 1min。
11. 11、95%乙醇快速脫水。無(wú)水乙醇脫水 3 次，每次 5～10s。
12. 二甲苯透明 3 次，每次 1～2min。中性樹(shù)膠封固。

染色結(jié)果：
細(xì)胞核，膠原纖維/蛋白 綠色

胞漿、肌肉、紅細(xì)胞 紅色
注意事項(xiàng)：
1. 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。固定起著重要的作用，使用不同的固定液可延或縮短染色時(shí)間。
2. 取 A1、A2 等量混合即為 Weigert 鐵蘇木素染液，一般 24h 失去染色力。
3. 酸性乙醇分化時(shí)間應(yīng)根據(jù)切片厚薄、組織的類(lèi)別和新舊而定。
4. 弱酸溶液可使色彩更清晰鮮艷，如使用量大可自行配制 0.1～0.3%乙酸溶液予以替代。
5. 磷鉬酸分化時(shí)要在鏡下控制，分化到膠原纖維呈淡紅色、纖維呈紅色即可。分化時(shí)間根據(jù)染色深淺而定，一般 1～2min。
6. Masson 藍(lán)化液亦可自行配制 Scott 促藍(lán)液或 0.1～1%碳酸鋰水溶液予以替代

Masson三色染色液(固綠法)