產(chǎn)品名稱:游離脂肪酸(FFA)含量檢測試劑盒
產(chǎn)品型號:BC0595
產(chǎn)品特點:游離脂肪酸(FFA)含量檢測試劑盒測定意義:FFA既是脂肪水解的產(chǎn)物,又是脂肪合成的底物。FFA的濃度與脂類代謝、糖代謝、內(nèi)分泌功能有關(guān),也可反映食物貯藏中的品質(zhì)變化。
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產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣 產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價格:780
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: : 游離脂肪酸檢測試劑盒|FFA檢測試劑盒| 游離脂肪酸|試劑盒
簡要介紹:
FFA既是脂肪水解的產(chǎn)物,又是脂肪合成的底物。血清中FFA的濃度與脂類代謝、糖代謝、內(nèi)分泌功能有關(guān)。
FFA與銅離子結(jié)合形成脂肪酸銅鹽,并溶于lv仿;利用銅試劑法測定銅離子含量,即可推算出游離脂肪酸含量。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體100 mL×1瓶,室溫保存。
試劑一:自備。實驗前,取一個玻璃瓶,按照正geng烷:無水甲醇:lv仿=24:1:25的比例配置(自備),蓋緊后混勻,室溫保存。
試劑二:液體6 mL×1瓶,室溫保存。
試劑三:粉劑×2瓶,4℃保存。臨用前在試劑瓶中加入13mL無水乙醇,充分溶解,4℃可保存一周。
標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1瓶,10mg棕櫚酸,室溫保存。臨用前把試劑轉(zhuǎn)移到10 mL玻璃瓶中,加入7.8 mLlv仿充分溶解,即為5μmol/mL的棕櫚酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。
產(chǎn)品說明:
FFA既是脂肪水解的產(chǎn)物,又是脂肪合成的底物。血清中FFA的濃度與脂類代謝、糖代謝、內(nèi)分泌功能有關(guān)。
FFA與銅離子結(jié)合形成脂肪酸銅鹽,并溶于lv仿;利用銅試劑法測定銅離子含量,即可推算出游離脂肪酸含量。
自備儀器和用品:
研缽、冰、臺式離心機、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、一個25 mL玻璃瓶、一個15mL玻璃瓶、正geng烷、無水甲醇、lv仿、無水乙醇和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣品中FFA提取:
1、血清中FFA測定:將所取血液,室溫靜置1 h 后,于4 ℃離心機3500 rpm離心15min,取上層血清置于-20℃冰箱保存,待測。
2、組織中FFA含量測定:組織用生理鹽水沖洗干凈后,用吸水紙吸取表面水分,稱取約0.1g,加入1.0 mL提取液,勻漿后,8000rpm,4℃離心10min,取上清液,待測。
二、測定:
1. 分光光度計預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長到550 nm,無水乙醇調(diào)零。
2. 試劑二在37℃水浴中預(yù)熱30 min以上。
3. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋成1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05μmol/mL。
4. 按下表在1.5mL離心管中加入相應(yīng)試劑
對照管 | 測定管 | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | |
蒸餾水(μL) | 10 | |||
樣本(μL) | 10 | |||
lv仿(μL) | 10 | |||
標(biāo)準(zhǔn)品(μL) | 10 | |||
試劑一(μL) | 100 | |||
試劑二(μL) | 40 | |||
充分振蕩10min后,3000rpm,離心10min | ||||
上層溶液(μL) | 50 | |||
試劑三(μL) | 200 | |||
充分振蕩2min后,靜置15min,取0.2mL于微量比色皿/96孔板,在550 nm下測吸光值,分別記為A對照管、A測定管、A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管。(對照管和空白管各只做一管) |
三、FFA含量計算:
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:
以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為x軸,以ΔA標(biāo)準(zhǔn)(ΔA=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)為y軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到方程y=kx+b。將ΔA(ΔA=A測定管-A對照管)帶入方程得到x。
2.血清中FFA含量計算
FFA(μmol/L)=1000x
(1)按樣本蛋白濃度計算
FFA含量(μmol/mg prot)=x÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
FFA(μmol/g鮮重)=x×V樣總÷W
V樣總:上清液總體積,1 mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣品質(zhì)量,g。
注意事項:
1.試劑三配制應(yīng)盡量晚配,可在操作到加入試劑二時,再配制試劑三。
2.必須保證每管的震蕩頻率及時間一致。
3.盡量在30min內(nèi)完成測量,并且測完后要密封好再丟棄。
4.因所用試劑多數(shù)為有機溶劑,同一支吸頭多次吸取會造成體積不準(zhǔn)確,建議更換吸頭。
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游離脂肪酸(FFA)含量檢測試劑盒
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